《恒古骨伤愈片中橙皮苷含量的检测方法》论文

2020-06-19实用文

  恒古骨伤愈片是由中成药恒古骨伤愈合剂(收载于《国家中成药标准汇编 骨伤科分册》)改变剂型而制成的新制剂[1],药味由陈皮、红花、三七等9味中药组成,具有活血益气、补肝肾、接骨续筋、消肿止痛、促进骨折愈合的功效,用于新鲜骨折及陈旧骨折、股骨头坏死、骨关节病、腰椎间盘突出症等。为控制本品的质量,本试验采用高效液相色谱(HPLC)法测定了恒古骨伤愈片中橙皮苷的含量,作为其内在质量控制指标之一。

  1 仪器与试药

  日本岛津LC-10 AT高效液相色谱仪;SPD-10A紫外检测器;KQ-250型超声波处理器。

  橙皮苷对照品购于中国药品生物制品检定所(批号1107221-200211,HPLC面积归一化法,测定含量为99.99%);恒古骨伤愈片由吉林万德制药有限公司提供(批号20080401, 20080402,20080403,20080501,20080502,20080503,20080504, 20080505,20080506,2008057)。其他所用化学试剂均为国产AR级。

  2 方法与结果

  2.1 色谱条件

  色谱柱:Shim-pack-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.4%磷酸水(20∶80);流速:1 mL/min;紫外检测波长:283 nm;理论塔板数按大黄素计算不低于5 000;柱温为室温[2]。

  2.2 对照品溶液的制备

  精密称取橙皮苷对照品适量,加甲醇制成每1 mL约含0.05 mg的.溶液,即对照品溶液。

  2.3 供试品溶液的制备

  取本品20片,研细,取约0.3 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 mL,称定重量,超声提取(功率180 W、频率60 kHz)30 min,取出,放冷,再称定重量,加甲醇补足减失的重量,摇匀,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,即得。

  2.4 阴性对照溶液的制备

  按处方量制备不含陈皮药材的阴性样品,按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10 μL,注入液相色谱仪中,按上述色谱条件测定。结果表明,阴性对照溶液色谱图中与对照品相应位置处无干扰,此法可行。

  2.5 线性关系考察

  精密称取橙皮苷对照品适量,加甲醇制成每1 mL含橙皮苷0.048 5 mg的对照品溶液。精密吸取对照品溶液4、8、12、16、20 μL注入高效液相色谱仪,记录色谱图,测定其峰面积。以峰面积值(A)对进样量(C)进行回归,得到回归方程为:Y=1 008 770.377X+25 623.859,r=0.999 9,结果表明,橙皮苷在0.194~0.970 μg范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系。

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